红景天属（Rhodiola sp.）约有73种，主要分布于西南、华中、西北、华北以及东北等地区[1]，其种类多，量大，是一种常用药材，多以根、茎或全草入药；无毒，能补肾和理气养血等[2]。该植物中的化学成分种类丰富，主要包括黄酮类、苯乙烷类和苯丙素类等[3]。屈珅玥[4]和吴亚茹[5]研究表明，其具有抗胆汁淤积和肿瘤的作用；胡樱等[6]和于冬建[7]研究发现，其上具有保护肝脏、抗炎、抗氧化、抗疲劳、抗缺氧、抗辐射和抗病毒等作用，在保健和治疗等方面应用广泛。
在众多红景天属植物中，仅大花红景天（Rhodiola crenulata）收载于《中华人民共和国药典》。近年来，人们对大花红景天的需求不断增加，其野生资源数量有限，红景天属植物的原植物形态相似，均具有指标性成分红景天苷[8]，因此有必要对红景天属植物药理学作用进行研究。本试验选取3种红景天属植物大花红景天、小丛红景天（Rhodiola dumulosa）和长鞭红景天（Rhodiola fastigiata）提取物进行抗疲劳试验，比较3种红景天提取物对小鼠运动性疲劳作用；以小鼠游泳时长为指标，选取超声时间、浸提温度和浸提时间3个因素进行单因素试验，探究3种提取物的最佳提取条件，为红景天属植物进一步开发和利用提供参考。
1 材料与方法
1.1 试验材料与试剂
大花红景天、小丛红景天和长鞭红景天，购于亳州圣禾堂药业。全血乳酸测试盒（南京建成生物工程研究所）、血尿素氮测试盒（南京建成生物工程研究所）；其他化学试剂均为国产分析纯。
1.2 试验仪器
UV752N分光光度计（上海科学精密仪器厂）、BSA-CW电子天平（北京赛多利斯仪器系统有限公司）、CS501恒温水浴锅（上海博迅实业有限公司）、PL-S100超声波清洗机（东莞康士洁超声波科技有限公司）和SIGMA3-30K离心机（德国Sigma公司）。
1.3 试验动物
6周龄健康SPF级C57雄性小鼠240只，体重18～22 g，分3批次引进，每批次80只，试验动物许可证号：SCXK（黑）2024-002。群笼饲养，5只/笼。
1.4 试验方法
1.4.1 红景天提取液制备
3种红景天分别于60 ℃恒温箱烘干，粉碎后过60目筛，准确称重后按1∶30料液比（g/mL）加入40%乙醇，室温浸泡24 h，超声破碎2 min，70 ℃水浴浸提2 h，4 000 r/min离心5 min取上清液，蒸发浓缩至一定体积，制备相当于10 mg/mL生药材的红景天提取液，置于4 ℃冰箱保存备用。
1.4.2 试验分组
将小鼠随机分为4个组，即空白对照组、大花红景天组、小丛红景天组和长鞭红景天组。各组小鼠自由摄食和饮水，3个红景天组按0.05 mL/20 g灌胃给予提取物，每日1次，持续15 d，空白对照组给予等体积蒸馏水。参考谢磊[9]研究方法，小鼠于末次灌胃1 h后将其置于水温（25±1） ℃、水深约30 cm的游泳箱中游泳。
1.4.3 提取条件优化
以小鼠游泳时长为指标，选取超声时间、浸提温度和浸提时间3个因素进行单因素实验。3种红景天分别采用不同的超声时间（2、4、6、8和10 min）、浸提温度（60、70、80、90和100 ℃）和浸提时间（1.0、1.5、2.0、2.5和3.0 h）进行提取条件优化。
1.5 测定指标和方法
1.5.1 游泳时长记录
每只小鼠从游泳开始到水下动作失去协调，头部无力浮出水面10 s时立即捞出，记为该鼠力竭游泳时长。
1.5.2 生化指标测定
1.6 数据统计
所有数据使用SPSS 20.0软件进行统计学分析处理，以“平均值±标准差”表示。
2 结果与分析
2.1 不同提取物对小鼠游泳时长的影响
如表1所示，与空白对照组相比，3种红景天组的小鼠游泳时长均明显增加（P<0.05），分别是空白对照组的3.68、2.51和2.37倍，其中大花红景天组小鼠游泳时间最长（98.3 min），小丛红景天组和长鞭红景天组间差异无统计学意义（P>0.05）。表明红景天可以明显提高小鼠的运动耐力，以大花红景天的提高效果较好。
表1 3种红景天提取物对小鼠游泳时长的影响 |
| 组别 | 游泳时长/min |
|---|---|
| 空白对照组 | 26.7±3.86 a |
| 大花红景天组 | 98.3±6.18 c |
| 小丛红景天组 | 67.0±4.43 b |
| 长鞭红景天组 | 63.2±3.08 b |
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2.2 不同提取物对小鼠生化指标的影响
由表2可知，与空白对照组相比，大花红景天组、小丛红景天组和长鞭红景天组的全血乳酸含量明显降低（P<0.05），分别降低32.4%、11.3%和19.6%，大花红景天组、小丛红景天组和长鞭红景天组的血清尿素氮含量明显低于空白对照组，分别降低22.0%、6.5%和12.8%。小丛红景天组和长鞭红景天组全血乳酸和血清尿素氮差异无统计学意义（P>0.05）。以上结果表明，大花红景天组降低全血乳酸和血清尿素氮含量效果最好。
表2 3种红景天提取物对小鼠全血乳酸和血尿素氮含量的影响 (mmol/L) |
| 组别 | 全血乳酸 | 血清尿素氮 |
|---|---|---|
| 空白对照组 | 11.15±1.08 a | 10.66±0.46 a |
| 大花红景天组 | 7.54±1.17 c | 8.32±0.67 c |
| 小丛红景天组 | 9.89±0.83 b | 9.97±0.75 b |
| 长鞭红景天组 | 8.97±1.31 b | 9.30±0.58 b |
2.3 不同提取条件对小鼠游泳时长的影响
2.3.1 超声时间
由图2可知，大花红景天组和小丛红景天组小鼠平均游泳时长随着超声时间增加变化趋势基本相同，呈先上升后下降趋势；在超声处理4 min时，平均游泳时长达到峰值，分别为88.7和63.5 min。长鞭红景天组小鼠平均游泳时长随着超声时间增加呈平稳下降趋势；在超声处理2 min时，平均游泳时长最长，为54.4 min。总的看来，超声时长对大花红景天组和小丛红景天组小鼠的平均游泳时长影响较大，对长鞭红景天组影响较小。
2.3.2 浸提温度
由图3可知，大花红景天组小鼠平均游泳时长随着浸提温度升高呈先增加后下降趋势，在浸提温度70 ℃时达到峰值，为93.1 min。小丛红景天组和长鞭红景天组小鼠平均游泳时长低于大花红景天组，小丛红景天组在60 ℃时达到峰值，为66.4 min；长鞭红景天组在70 ℃时达到峰值，为53.8 min。由此可知，浸提温度对小鼠的平均游泳时长有较大影响。
2.3.3 浸提时间
3 结论与讨论
力竭游泳时间是反映机体运动耐力的重要指标之一，全血乳酸含量可以反映机体有氧代谢能力、疲劳产生和消除的速度；血清尿素氮的含量与机体机能、疲劳程度密切相关，这两个指标是反映机体疲劳的代表性生化指标。本研究发现，大花红景天、小丛红景天和长鞭红景天提取物均可以明显延长小鼠游泳力竭时间，降低小鼠的全血乳酸和血清尿素氮含量，生化指标的测定结果与小鼠游泳时长测定结果相吻合。结果表明，大花红景天、小丛红景天和长鞭红景天具有相似作用，可提升小鼠运动水平，降低其全血乳酸和血尿素氮含量，以起到抗疲劳的作用。王艺博等[10]研究发现，大株红景天可明显降低小鼠体内的血清尿素氮和乳酸的含量。本研究结果与此研究结果一致。
综上，本研究通过研究大花红景天、小丛红景天和长鞭红景天3种提取物对小鼠游泳时长和抗疲劳的影响，发现3种提取物均能有效延长小鼠游泳力竭时间，降低其体内的全血乳酸和血清尿素氮含量，具有一定的抗疲劳作用，其中大花红景天提取物的抗疲劳效果较好。通过优化提取条件发现，大花红景天最优提取条件为超声时间4 min、浸提温度70 ℃和浸提时间1.5 h；小丛红景天最优提取条件为超声时间4 min、浸提温度60 ℃和浸提时间2.0 h；长鞭红景天最优提取条件为超声时间2 min、浸提温度为70 ℃和浸提时间1.5 h。本研究结果为红景天属植物的进一步开发和利用提供参考。