大型真菌指肉眼可见，在生态系统中发挥一定生态作用的一类真菌的统称[1]。在已发现的真菌中，种类较多的类群包括担子菌门（Basidiomycetes）和子囊菌门（Ascomycota），主要有食用和药用作用，具有重要的经济和社会效益。
大型真菌作为生态系统的一部分，主要充当分解者的角色[2]，是物质循环和能量流动的“助推器”;同时，部分稀有食用真菌因口感独特、味道鲜美，被广泛种植食用，如蜜环菌（Armillaria mellea）[3]、黑木耳（Auricularia heimuer）[4]和大球盖菇（Stropharia rugosoannulata）[5]等，另一部分因含有特殊化学成分，在医疗、健康保养等方面发挥重要作用[6]。例如，宋吉玲等[7]研究发现杨树桑黄（Sanghuangporus vaninii）、鲍姆桑黄（S. baumii）和桑树桑黄（S. sanghuang）均具有较强的抗氧化活性，多酚、黄酮和抗坏血酸含量均可作为评价桑黄抗氧化活性的主要指标。咸丰县位于湖北省西南部，武陵山区东麓，自然条件优越，属亚热带季风性湿润气候区[8]，降水充沛，光照充足，植被类型丰富，蕴藏丰富的野生真菌资源。武陵山区作为中国生物多样性研究热点区域，其真菌资源研究尚存空白，开展野生真菌资源调查，不仅有助于了解研究区真菌种类，填补鄂西南地区大型真菌本底数据，为《中国真菌志》编纂提供新资料，丰富湖北省真菌生物多样性，还对当地珍贵真菌资源的保护，协调真菌与人类之间可持续发展具有重要意义。
1 材料与方法
1.1 试验材料
研究所需材料自2024年2—12月采集于湖北咸丰县忠建河大鯢自然保护区、国有坪坝营林场、坪坝营国家级森林公园和咸丰县城周边区域，采样点平均海拔1 000 m，植被类型以针阔叶混交林为主，采用随机采样的方法，对林草湿地开展取样。
1.2 试验方法
1.2.1 生物学鉴定
采集真菌样本，拍摄子实体生境照片，详细记录生物特征，带回实验室，一部分样本进行50 ℃烘干，置于备有硅胶的自封袋中进行分子鉴定；另一部分进行显微结构观察，采用徒手切片的方法，用1%刚果红溶液染色，以便观察孢子、担子等结构。1 g碘、3 g碘化钾和40 g水合氯醛溶于40 mL蒸馏水中制作成梅氏试剂，用于子实体组织结构，特别是担孢子拟糊精质或淀粉质反应的检测[1]。
采用CTAB法提取总DNA[9]，对提取的DNA进行PCR扩增，上游引物为ITS1 F（CTTGGTCATTTAGAGGAAGTAA）、ITS5（GGAAGTAAAAGTCGTAACAAGG），下游引物为ITS4（TCCTCCGCTTATTGATATGC）。反应体系：22 μL 1.1×Super PCR Mix，正反引物各1 μL，DNA模板1 μL。反应条件：94 ℃预变性5 min，进入38个循环，单个循环条件为94 ℃变性30 s，53 ℃退火30 s，72 ℃延伸50 s，循环结束后72 ℃延伸10 min，最后于12 ℃保存。产物观察检测：采用1%琼脂糖凝胶，110 V电泳20 min定性检测，将具有阳性条带的PCR产物送生物公司检测[10]。将检测所得的ITS序列拷入NCBI数据库中进行比对，选取相似度最高的序列，结合形态学特征，确定所属种。
1.2.2 统计分析
1.3 数据处理
采用Origin 2021软件进行图表制作。
2 结果与分析
2.1 大型真菌物种多样性
表1 大型真菌物种目录 |
| 门 | 纲 | 目 | 科 | 属 | 种数 |
|---|---|---|---|---|---|
| 担子菌门 （Basidiomycota） | 蘑菇纲 （Agaricomycetes） | 蘑菇目 （Agaricales） | 蘑菇科（Agaricaceae） | 蘑菇属（Agaricus） | 2 |
| 环柄菇属（Lepiota） | 1 | ||||
| 皮孔菌科（Porotheleaceae） | 皮孔菌属（Porotheleum） | 1 | |||
| 假湿柄伞属（Pseudohydropus） | 1 | ||||
| 鬼伞科（Psathyrellaceae） | 黄盖小脆柄菇属（candolleomyces） | 2 | |||
| 小脆柄菇属（Psathyrella） | 1 | ||||
| 假脐菇科（Tubariaceae） | 环伞属（Cyclocybe） | 1 | |||
| 轴腹菌科（Hydnangiaceae） | 蜡蘑属（Laccaria） | 1 | |||
| 马勃科（Lycoperdaceae） | 秃马勃属（Calvatia） | 1 | |||
| 马勃属（Lycoperdon） | 1 | ||||
| 小皮伞科（Marasmiaceae） | 小皮伞属（Marasmius） | 1 | |||
| 小菇科（Mycenaceae） | 小菇属（Mycena） | 1 | |||
| 类脐菇科（Omphalotacae） | 拟金钱菌属（Collybiopsis） | 1 | |||
| 裸柄伞属（Gymnopus） | 3 | ||||
| 微皮伞属（Marasmiellus） | 1 | ||||
| 微菇属（Mycetinis） | 1 | ||||
| 球盖菇科（Strophariaceae） | 垂幕菇属（Hypholoma） | 1 | |||
| 鳞伞属（Pholiota） | 1 | ||||
| 泡头菌科（Physalacriaceae） | 鳞盖菇属（Cryptotrama） | 1 | |||
| 侧耳科（Pleurotaceae） | 亚侧耳属（Hohenbuehelia） | 1 | |||
| 侧耳属（Pleurotus） | 1 | ||||
| 木耳目（Auriculariales） | 木耳科（Auriculariaceae） | 木耳属（Auricularia） | 1 | ||
| 牛肝菌目（Boletales） | 牛肝菌科（Boletaceae） | 金牛肝菌属（Aureoboletus） | 2 | ||
| 黏褶菌目（Gloeophyllales） | 黏褶菌科（Gloeophyllaceae） | 粘褶菌属（Gloeophyllum） | 1 | ||
| 锈革孔菌目 （Hymenochaetales） | 集毛菌科（Coltriciaceae） | 集毛菌属（Coltricia） | 1 | ||
| 硬孔菌科（Rigidoporaceae） | 硬孔菌属（Rigidoporus） | 1 | |||
| 多孔菌目 （Polyporales） | 丝皮革菌科（Hyphodermataceae） | 丝皮菌属（Hyphoderma） | 1 | ||
| 干皮菌科（Incrustoporiaceae） | 干酪菌属（Tyromyces） | 1 | |||
| 多孔菌科（Polyporaceae） | 蜡孔菌属（Cerioporus） | 1 | |||
| 栓孔菌属（Cubamyces） | 1 | ||||
| 灵芝属（Ganoderma） | 3 | ||||
| 香菇属（Lentinus） | 1 | ||||
| 革裥菌属（Lenzites） | 1 | ||||
| 多年卧孔菌属（Perenniporia） | 1 | ||||
| 黑柄多孔菌属（Polyporus） | 2 | ||||
| 红菇目 （Russulales） | 耳匙菌科（Auriscalpiaceae） | 耳匙菌属（Aurisculpium） | 1 | ||
| 红菇科（Russulaceae） | 乳菇属（Lactarius） | 1 | |||
| 红菇属（Russula） | 1 | ||||
| 子囊菌门 （Ascomycota） | 锤舌菌纲 （Leotiomycetes） | 柔膜菌目（Helotiales） | 柔膜菌科（Helotiaceae） | 二头孢盘菌属（Dicephalospora） | 1 |
| 盘菌纲 （Pezizomycetes） | 盘菌目（Pezizales） | 马鞍菌科（Helvellaceae） | 马鞍菌属（Helvella） | 1 | |
| 肉盘菌科（Sarcosomataceae） | 暗盘菌属（Plectania） | 1 | |||
| 丛耳科（Wynneaceae） | 丛耳属（Wynnea） | 1 | |||
| 粪壳菌纲 （Sordariomycetes） | 炭角菌目（Xylariales） | 炭团菌科（Hypoxylaceae） | 轮层炭壳属（Daldinia） | 1 | |
| 肉座菌目（Hypocreales） | 虫草科（Cordycipitaceae） | 棒束孢属（Isaria） | 1 |
2.2 优势科属
研究区大型真菌优势科（种数≥3）有4个（表2），分别为蘑菇科（Agaricaceae）、鬼伞科（Psathyrellaceae）、类脐菇科（Omphalotacae）和多孔菌科（Polyporaceae），其中菌种数最多的科为多孔菌科（10种），占比19.2%；其次为类脐菇科，有6种，占比11.5%；蘑菇科和鬼伞科均有3种。
表2 研究区大型真菌优势科 |
| 科 | 科内种数/个 | 占比/% |
|---|---|---|
| 蘑菇科 | 3 | 5.8 |
| 鬼伞科 | 3 | 5.8 |
| 类脐菇科 | 6 | 11.5 |
| 多孔菌科 | 10 | 19.2 |
研究区大型真菌优势属（种数≥3）有2个（表3），分别为裸柄伞属（Gymnopus）和灵芝属（Ganoderma），占总属数的4.5%，含2个菌种数的属有4个，含1个菌种数的属有38个，分别占总属数的9.1%和86.4%。
表3 研究区大型真菌优势属 |
| 属 | 属内种数/个 | 占比/% |
|---|---|---|
| 裸柄伞属 | 3 | 5.8 |
| 灵芝属 | 3 | 5.8 |
2.3 菌种等级评估及经济价值
研究区52种大型真菌等级及经济价值评估结果见表4。其中食用菌9种，药用菌10种 ，食药用菌5种，木腐菌4种，未知用途17种，中国特有种2种，近危菌种1种。
表4 研究区大型真菌等级评估及经济价值 |
| 学名 | 经济价值 | 评估等级 |
|---|---|---|
| 球基蘑菇（Agaricus abruptibulbus） | 有毒 | LC |
| 细丛卷毛柄蘑菇（Agaricus flocculosipes） | 有毒 | DD |
| 梭孢环柄菇（Lepiota magnispora） | 食用 | LC |
| 毛木耳（Auricularia cornea） | 食药 | LC |
| 东方耳匙菌（Aurisculpium orientale） | 未知 | DD |
| 小条孢牛肝菌（Aureoboletus shichianus） | 食用 | LC |
| 臧氏金牛肝菌（Aureoboletus zangii）* | 未知 | DD |
| 魏氏集毛孔菌（Coltricia weii）* | 木腐菌 | DD |
| 深褐褶菌（Gloeophyllum sepiarium） | 食药 | LC |
| 紫晶蜡蘑（Laccaria amethystina） | 食用 | LC |
| 刚毛丝毛伏革菌（Hyphoderma setigerum） | 未知 | LC |
| 薄皮干酪菌（Tyromyces chioneus） | 药用 | LC |
| 头状秃马勃（Calvatia craniiformis） | 食药 | DD |
| 网纹马勃（Lycoperdon perlatum） | 有毒 | LC |
| 宽柄小皮伞（Marasmius laticlavatus） | 未知 | DD |
| 粉被小菇（Mycena zephirus） | 药用 | DD |
| 富尔瓦拟金钱菌（Collybiopsis fulva） | 未知 | DD |
| 栎裸角菇（Gymnopus dryophilus） | 食用 | LC |
| 枝生裸脚伞（Gymnopus ramulicola） | 未知 | DD |
| 特罗格裸柄伞（Gymnopus trogioides） | 未知 | DD |
| 纯白小皮伞（Marasmiellus candidus） | 食用 | LC |
| 蒜头状微菇（Mycetinis scorodonius） | 食药 | LC |
| 粗糙鳞盖菇（Cyptotrama asprata） | 木腐菌 | LC |
| 勺形亚侧耳（Hohenbuehelia petaloides） | 食用 | LC |
| 桃红侧耳（Pleurotus djamor） | 食药 | LC |
| 鳞蜡孔菌（Cerioporus squamosus） | 食用 | LC |
| 乳白栓孔菌（Cubamyces lactineus） | 药用 | DD |
| 树舌灵芝（Ganoderma applanatum） | 药用 | NT |
| 有柄树舌（Ganoderma gibbosum） | 药用 | LC |
| 赤芝（Ganoderma lucidum） | 药用 | DD |
| 漏斗多孔菌（Lentinus arcularius） | 药用 | DD |
| 桦褶孔菌（Lenzites betulinus） | 药用 | LC |
| 淡黄多年卧孔菌（Perenniporia medulla-panis） | 木腐菌 | LC |
| 莽山多孔菌（Polyporus mangshanensis） | 未知 | DD |
| 近网柄多孔菌（Polyporus subdictyopus） | 未知 | DD |
| 脐状皮孔菌（Porotheleum omphaliiforme） | 未知 | DD |
| 毛腿拟湿柄伞（Pseudohydropus floccipes） | 未知 | DD |
| 黄盖小脆柄菇（Candolleomyces candolleanus） | 食用 | DD |
| 皱纹马鞍菌（Helvella rugosa） | 未知 | DD |
| 褐黄小脆柄菇（Psathyrella subnuda） | 未知 | DD |
| 楔囊硬孔菌（Rigidoporus cuneatus） | 未知 | DD |
| 近毛脚乳菇（Lactarius subhirtipes） | 有毒 | DD |
| 近葡萄酒色红菇（Russula aff. vinacea） | 未知 | DD |
| 簇生垂幕菇（Hypholoma fasciculare） | 有毒 | LC |
| 多环鳞伞（Pholiota multicingulata） | 有毒 | DD |
| 深色环伞（Cyclocybe erebia） | 食用 | LC |
| 橙红二头孢盘菌（Dicephalospora rufocornea） | 木腐菌 | DD |
| 米勒红盘菌（Plectania milleri） | 未知 | DD |
| 美洲丛耳菌（Wynnea americana） | 有毒 | DD |
| 启迪轮层炭壳（Daldinia childiae） | 药用 | DD |
| 蝉花（Isaria cicadae） | 药用 | DD |
| 具沟坎德尔菇（Candolleomyces sulcatotuberculosus） | 未知 | DD |
|
2.4 属的地理成分分析
对研究区大型真菌44个属进行地理分析，主要划分为3类（表5）。
表5 研究区大型真菌区系成分及占比 |
| 区系成分 | 属数/个 | 占比/% |
|---|---|---|
| 世界广布属D1 | 36 | 81.8 |
| 温带分布属D2 | 6 | 13.6 |
| 东亚—北美分布属D3 | 2 | 4.5 |
（1）世界广布属D1在全世界广泛分布，无明确的集中分布点。世界广布属有蘑菇属（Agaricus）、环柄菇属（Lepiota）、皮孔菌属（Porotheleum）、假湿柄伞属（Pseudohydropus）、小脆柄菇属（Psathyrella）、圆盖伞属（Cyclocybe）、蜡蘑属（Laccaria）、秃马勃属（Calvatia）、马勃属（Lycoperdon）、小皮伞属（Marasmius）、小菇属（Mycena）、拟金钱菌属（Collybiopsis）、裸脚伞属（Gymnopus）、垂幕菇属（Hypholoma）、微皮伞属（Marasmiellus）、微菇属（Mycetinis）、鳞盖菇属（Cyptotrama）、亚侧耳属（Hohenbuehelia）、侧耳属（Pleurotus）、木耳属（Auricularia）、粘褶菌属（Gloeophyllum）、集毛菌属（Coltricia）、硬孔菌属（Rigidoporus）、丝毛伏革菌属（Hyphoderma）、干酪菌属（Tyromyces）、蜡孔菌属（Cerioporus）、灵芝属（Ganoderma）、韧伞属（Lentinus）、革裥菌属（Lenzites）、多年卧孔菌属（Perenniporia）、多孔菌属（Polyporus）、红菇属（Russula）、暗盘菌属（Plectania）、丛耳属（Wynnea）、轮层炭壳属（Daldinia）、棒束孢属（Isaria）。
（2）温带分布属D2，该属分布中心位于南北半球温带地区。温带分布属有黄盖小脆柄菇属（candolleomyces）、鳞伞属（Pholiota）、栓孔菌属（Cubamyces）、耳匙菌属（Aurisculpium）、乳菇属（Lactarius）、马鞍菌属（Helvella）。
（3）东亚—北美分布属D3，该属主要分布在亚洲东部区域和北美地区。东亚—北美分布属主要有金牛肝菌属（Aureoboletus）、二头孢盘菌属（Dicephalospora）。
3 结论与讨论
3.1 讨论
3.1.1 研究区大型真菌多样性
此次调查共发现湖北省新纪录种13种，分别是梭孢环柄菇（Lepiota magnispora）、粉被小菇（Mycena zephirus）、富尔瓦拟金钱菌（Collybiopsis fulva）、枝生裸脚伞（Gymnopus ramulicola）、特罗格裸柄伞（Gymnopus trogioides）、蒜头状微菇（Mycetinis scorodonius）、鳞蜡孔菌（Cerioporus squamosus）、毛腿拟湿柄伞（Pseudohydropus floccipes）、具沟坎德尔菇（Candolleomyces sulcatotuberculosus）、近葡萄酒色红菇（Russula aff. vinacea）、皱纹马鞍菌（Helvella rugosa）、米勒红盘菌（Plectania milleri）、美洲丛耳菌（Wynnea americana）。研究区大型真菌新纪录种的发现增加了真菌种类，丰富了大型真菌多样性。同时，梭伦剥管孔菌（Piptoporus soloniensis）可能指示鄂西南与华中地区的生境连通性。
3.1.2 研究区大型真菌评价
研究区大型真菌主要包括食用菌、药用菌、食药用菌，经济价值开发前景广阔，例如，柏晓冉等[20]研究发现，毛木耳（Auricularia cornea）菌株AC5对不同结构的染料均具有一定的降解作用，尤其是三苯甲烷类染料。Sharif等[21]研究发现，灵芝（Ganoderma lucidum）生物活性化合物可以作为α-葡萄糖苷酶抑制剂。竹根菌（Pleurotus djamor）作为一种兼具药用和高营养价值的真菌，张思建[22]已成功实现其人工栽培，未来有望推动产业化发展，进而带动当地经济发展。在充分了解当地菌种及价值的前提下，择优选取合适菌种发展菌业，不仅可以保存优质菌种，还可以创造经济和社会效益[23]。同时，有毒菌的发现提醒相关人员要注意食品安全，避免盲目采食和售卖野生菌，加强相关科普宣传[24]。对研究区大型真菌区系成分进行分析，发现以世界广泛分布属为主，温带分布属和东亚—北美分布属占比较低，后续还可进行深入调查研究，可能存在其他区系成分有待被挖掘。
3.2 结论
研究区大型真菌资源调查共鉴定出52种大型真菌，调查共发现新纪录种13种，补充了菌类资源，丰富了生物多样性。52种大型真菌中，优势科（种数≥3）有4个，分别为蘑菇科（Agaricaceae）、鬼伞科（Psathyrellaceae）、类脐菇科（Omphalotacae）和多孔菌科（Polyporaceae）；优势属（种数≥3）有2个，分别为裸柄伞属（Gymnopus）和灵芝属（Ganoderma）；包括多种食用、药用、食药用菌和有毒菌，菌类资源丰富。近危菌种的发现提示，应加强生态环境保护，促进人与自然和谐共生。