铃兰（Convallaria keiskei）为百合科多年生草本植物，花白色，垂若串铃，清香四溢；叶挺实而柔滑，叶色翠绿[1]。近年来，关于该植物的研究主要集中在园林绿化、组织培养、观赏价值、药用价值和加工利用等方面。李东林等[2]研究表明，水肥耦合对铃兰观赏品质和光合特性影响显著。王小涵等[3]采用铃兰的不同器官作为外植体，构建了铃兰高效繁育体系。程志国[4]研究认为，野生宿根花卉铃兰生态适应性较强。城市高层建筑遮挡及园林乔灌复层配植，易形成大面积弱光生长环境。铃兰多生于半阴坡林下，常呈片状群落分布，耐寒能力突出，生态适应性较强，具备较高的引种栽培与园林应用价值。研究野生铃兰生长发育节律和繁殖方式，对创造良好的栽培环境、扩大其繁殖系数及提高植株的抗逆性、丰富园林景观具有重要的实践意义。本研究以采集于山东省烟台市昆嵛山的野生铃兰为材料，对其物候期、年生长量和种子千粒重进行了连续观测，并探究了浸种温度、环境温度和外源赤霉素浓度对种子萌发的影响，以及基质与季节对铃兰分株繁殖的影响，为其推广应用提供参考。
1 材料与方法
1.1 试验材料
供试材料为2023年9月采集于昆嵛山的野生铃兰，共100株，栽植于青岛市技师学院试验田，进行生长发育节律的观测。
1.2 试验设计
1.2.1 生长发育节律观测
（1）物候期。对引种至试验田的野生铃兰植株进行物候期观测，系统记录其关键生育阶段，包括出苗期、展叶期、始花期、盛花期、末花期、叶变色期、果红熟期及休眠期等[5]。每隔3 d观察1次，进入展叶期与开花期后，每隔1 d观察1次。各指标均进行3次重复测定，取平均值。生长时期各性状的描述如下：出苗期，试验田内25%～75%的小苗从地面露出；展叶期，试验田内植株地上部分萌发的叶片完全展开；始花期，试验田内约10%的植株出现第一朵开放的花朵；盛花期，试验田内50%～70%的植株花序完全开放；末花期，试验田内80%～90%的植株花序已开放；叶变色期，试验田内生长状态良好的植株，叶片颜色开始转变为黄色；果实红熟期，试验田内约90%的植株果实变为红色；休眠期，落叶后至地上部枯死前。（2）植株年生长量。在试验田内随机选取15株植株进行定株观测，每隔3 d测量基部至顶端的垂直距离（cm）1次，计算生长量，取平均值，分析引种的野生铃兰在不同时期的生长速度，并划分其生长时期。（3）种子千粒重。参照《国际种子检验规程（2019版）》开展种子检验，采用百粒重复法测定，筛选籽粒饱满的供试种子，从试验样品内随机抽取8组平行试样，每组100粒种子，分别称量后计算平均值并换算为千粒重。
1.2.2 种子萌发试验
（1）浸种温度对种子萌发的影响。将采集到的种子沙藏60 d后，进行萌发试验。将种子分别置于恒温水浴中（30、40、50、60和70 ℃）处理10 min，放入25 ℃光照培养箱内进行萌发试验，同时设置室温（25±1）℃浸种处理作为对照组，分析不同温度水浴对种子萌发的影响。（2）环境温度对种子萌发的影响。将采集到的种子沙藏60 d后，进行萌发试验。将种子置于清水中浸泡18 h，完成浸种处理后，将其转移至光照培养箱内（10、15、20、25和30 ℃）开展萌发试验。（3）赤霉素处理对种子萌发的影响。选取质量浓度分别为50、100、150、200和250 mg/L的赤霉素溶液，分别对试验种子进行16 h浸种处理，以纯水浸种处理作为对照组，将所有处理组种子均放入25 ℃光照培养箱中开展后续培养试验。涉及计算公式如式（1 ）～（3 ）。
发芽率=60 d内发芽总数/供试种子数×100%
发芽势=25 d内发芽总数/供试种子数×100%
发芽指数=ΣGt /Dt
1.2.3 分株繁殖试验
（1）基质对分株繁殖的影响。采用沙、草炭、草炭∶珍珠岩（1∶1）、沙∶草炭∶珍珠岩（1∶1∶1）和园土5种基质，每个处理20个根段，重复3次。扦插两个月后，统计生根率、根长、生根数量、芽长和芽宽，每个重复选取30株扦插苗，生根率以新根≥0.5 cm且无腐烂的有效生根株数占总测定株数的百分比计算（总样本量90株，结果取平均值）；根长与生根数量从每个重复的有效生根株中选10株（共30株），洗净擦干后，用精度0.01 cm的游标卡尺测量每株3条最长新根的根基部至根尖距离，取平均值，同时计数≥0.5 cm的有效新根总数，取平均值；芽长与芽宽选取30株扦插苗（含未生根但有新芽的植株），用游标卡尺测量新芽基部至顶端（或最顶端叶尖）的直线距离为芽长，测量新芽中部最大横向直径（或最宽处距离）为芽宽，取平均值。（2）季节对分株繁殖的影响。分别于3月植株萌动前，11月植株完全休眠后，选取具潜伏芽的地下根状茎，切成约5 cm的长段，断面处涂抹草木灰，于春秋两季定植于育苗畦，控制栽植株距为10 cm、栽植深度为5 cm，覆土厚度保持在3～5 cm，栽植后维持土壤湿润状态即可，2个月后统计生根情况。
1.3 数据分析
试验数据采用Excel软件进行整理，采用SPSS 26.0软件开展统计，利用单因素方差分析结合Duncan新复极差法进行组间显著性多重比较。
2 结果与分析
2.1 铃兰生长发育节律
2.1.1 物候期
试验观察表明，引种地栽植铃兰生长良好，均能够正常开花结实。如表1所示，铃兰4月上旬以圆锥状形态露出地面，约9 d后陆续展叶，4月中下旬进入展叶期，植株生长速度较快，日生长量在1～2 cm。5月上旬进入花期，单朵花期在3～4 d，单株植株的花期约10 d，群体植株的花期约20 d。7—8月，根茎上产生新的顶芽，9—10月，根茎上生出大量的新生根。
表1 物候期观测记录（平均） |
| 物候期 | 日期 |
|---|---|
| 出苗期 | 4月10—13日 |
| 展叶始期 | 4月19—22日 |
| 展叶盛期 | 4月23—26日 |
| 开花始期 | 4月26—28日 |
| 开花盛期 | 5月1—9日 |
| 开花末期 | 5月12—15日 |
| 叶变色期 | 9月15—21日 |
| 果实红熟期 | 10月1—9日 |
| 休眠期 | 11月9日 |
2.1.2 生长量
2.1.3 千粒重
经试验测定，铃兰种子的千粒重为24.372 g。
2.2 不同因素对铃兰种子萌发的影响
2.2.1 浸种温度
由表2可知，随着浸种温度的升高，铃兰种子的发芽率、发芽势和发芽指数均呈先升高后降低的趋势，其中40 ℃处理组的发芽率、发芽势与发芽指数最高，分别为44.01%、28.63%和2.32，与其他温度处理组差异具有统计学意义（P<0.05）。
表2 不同浸种温度对种子萌发的影响 |
| 温度/℃ | 发芽率/% | 发芽势/% | 发芽指数 |
|---|---|---|---|
| CK | 35.21 bc | 23.96 bc | 2.01 bc |
| 30 | 37.86 b | 25.20 b | 2.16 b |
| 40 | 44.01 a | 28.63 a | 2.32 a |
| 50 | 37.21 b | 24.91 b | 2.10 b |
| 60 | 29.21 cd | 16.23 cd | 1.86 cd |
| 70 | 26.93 d | 13.26 d | 1.50 d |
|
2.2.2 环境温度
由表3可知，在10～25 ℃范围内，铃兰种子的发芽率、发芽势和发芽指数均随培养温度的上升而递增。当培养温度升至25 ℃时，其发芽率、发芽势及发芽指数均最高，分别为35.21%、23.96%和2.13，其中25 ℃处理组的发芽率与10、15、20 ℃处理组差异具有统计学意义（P<0.05）；25 ℃处理组的发芽势、发芽指数与10、15 ℃处理组差异具有统计学意义（P<0.05）。
表3 不同环境温度对种子萌发的影响 |
| 温度/℃ | 发芽率/% | 发芽势/% | 发芽指数 |
|---|---|---|---|
| 10 | 13.72 d | 5.21 e | 1.43 c |
| 15 | 15.30 cd | 7.68 c | 1.57 c |
| 20 | 26.30 b | 16.21 ab | 1.93 ab |
| 25 | 35.21 a | 23.96 a | 2.13 a |
| 30 | 30.37 ab | 17.98 ab | 2.07 ab |
2.2.3 赤霉素处理
由表４可知，适宜浓度的赤霉素对铃兰种子发芽率与发芽势具有显著提升作用，其中100 mg/L赤霉素处理表现最佳，发芽率、发芽势及发芽指数分别为49.01%、30.10%和2.82，与其余处理组差异具有统计学意义（P<0.05）。
表4 不同赤霉素浓度对种子萌发的影响 |
| 赤霉素浓度/（mg/L） | 发芽率/% | 发芽势/% | 发芽指数 |
|---|---|---|---|
| CK | 35.21 c | 23.96 c | 2.01 b |
| 50 | 37.92 b | 26.32 b | 2.10 b |
| 100 | 49.01 a | 30.10 a | 2.82 a |
| 150 | 37.43 b | 25.81 b | 2.00 b |
| 200 | 25.11 d | 13.23 d | 1.76 c |
| 250 | 20.93 e | 11.26 e | 1.30 d |
2.3 不同因素对铃兰分株繁殖的影响
2.3.1 基质
由表5可知，草炭∶珍珠岩∶沙（1∶1∶1）处理的铃兰根茎生根率最高，达89%；其次是草炭处理，生根率为85%，园土处理生根率最低，说明以草炭∶珍珠岩∶沙（1∶1∶1）和草炭基质对铃兰生根有明显的促进作用。草炭∶珍珠岩∶沙（1∶1∶1）处理下根长最长（8.20 cm），沙处理下根长最小（5.10 cm），说明草炭∶珍珠岩∶沙（1∶1∶1）处理有利于促进铃兰根系生长。沙处理下生根数最多（9.50条），与其余处理差异具有统计学意义（P<0.05），说明沙处理对于根茎生根有明显的促进作用。草炭∶珍珠岩∶沙（1∶1∶1）处理下铃兰新生芽长和芽宽均最大，分别为2.00、0.61 cm。综合来看，在草炭：珍珠岩：沙（1∶1∶1）处理下，铃兰根茎生根率较高，根长最长，生根数和发育情况良好，为最佳的基质。
表5 基质对铃兰扦插生根的影响 |
| 处理 | 生根率/% | 根长/cm | 根数/条 | 芽长/cm | 芽宽/cm |
|---|---|---|---|---|---|
| 园土 | 78 d | 5.60 c | 6.20 c | 1.72 b | 0.60 a |
| 沙 | 80 b | 5.10 c | 9.50 a | 1.25 c | 0.30 c |
| 草炭∶珍珠岩∶沙（1∶1∶1） | 89 a | 8.20 a | 7.50 b | 2.00 a | 0.61 a |
| 草炭 | 85 bc | 7.80 ab | 6.30 c | 1.60 b | 0.46 b |
| 草炭∶珍珠岩（1∶1） | 81 c | 7.00 b | 5.00 d | 1.50 c | 0.57 a |
2.3.2 季节
秋季开展铃兰分株繁殖的成活率高于春季。于11月植株进入完全休眠期后进行分株，成活率达92%；春季分株成活率为85%。
3 结论与讨论
试验观察结果显示，从2023年9月初至次年3月，铃兰的新生根茎形态上未出现明显改变，芽长维持在2 cm左右。说明期间新生根茎的生长处于停滞状态，此阶段植株地上部分已完全枯萎，导致其无法向地下根茎输送所需营养物质；同时，随着环境温度持续下降，新生根茎的生理代谢活动逐步减弱。由此推测，此时段内铃兰为抵御外界不利环境，新生根茎通常会处于生理休眠状态，以减少外界环境胁迫对自身的损害。铃兰种子在5个月的萌发期间均未发生霉变，可能与该种子的浸出液中存在某种能够抑制霉菌生长的物质，或与铃兰全草中含有的铃兰毒苷等成分有关。
在草炭∶珍珠岩∶沙（1∶1∶1）处理下，铃兰根茎生根率较高，根长最长，生根数量和发育情况良好。观察发现，部分铃兰根茎在园土条件下出现腐烂现象，可能是因为园土基质疏松程度差、易板结和积水，不利于根茎呼吸。根茎分株繁殖试验发现，秋季开展铃兰分株繁殖的成活率高于春季。早春气候多变，铃兰根系较浅，应适当浅栽，覆盖1～2层塑料薄膜保温的同时能够提高成活率。